HL10366.2 v. A 人體血小板高純分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 主要用途 人體血小板高純分離試劑是一種旨在通過(guò)等密度離心的方法,直接從人體全血樣品中分離出結(jié)構(gòu)完整而高度純化的血小板組分的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于人體(生理或病理)血小板的制備。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,純度可達(dá)99%??梢员挥糜?/span>凝集試驗(yàn)、功能檢測(cè)等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度保證。 技術(shù)背景 血小板(plaet),又稱(chēng)為凝血細(xì)胞(thrombocytes),是一種小而形狀規(guī)則的細(xì)胞片段,直徑2至3微米。其前體為巨核細(xì)胞(megakaryocytes),平均生命周期5至9天。血小板在止血過(guò)程(hemostasis)中起著重要作用,幫助形成血液凝塊,同時(shí)也是多種生長(zhǎng)因子,包括血小板源生長(zhǎng)因子(plaet-derived growth factor)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor-β;TGF-β)、堿性纖維原細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor;bFGF)等的自然來(lái)源。體內(nèi)血小板數(shù)量和功能異常會(huì)產(chǎn)生血小板病(thrombocytopathy):血小板過(guò)低(thrombocytopenia)或功能降低(thrombasthenia),將導(dǎo)致出血;過(guò)高(thrombocytosis)則容易產(chǎn)生血淤,而引起中風(fēng)、心肌梗塞、肺栓塞(embolism)。血小板的分離是現(xiàn)代血液學(xué)研究的zui常用的手段之一。福特(Ford)等使用等密度介質(zhì)(1.063克/毫升),通過(guò)低速離心,一步從紅細(xì)胞和白細(xì)胞中獲得純度更高、活性保證、結(jié)構(gòu)完整的血小板。 產(chǎn)品內(nèi)容 高純液(Reagent A) 毫升 稀釋液(Reagent B) 毫升 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份 保存方式 保存在4℃冰箱里;高純液(Reagent A),避免光照;嚴(yán)格無(wú)菌操作;有效保證6月 用戶(hù)自備 2毫升離心管:用于樣品操作的容器 15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器 4℃(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作 實(shí)驗(yàn)步驟 - 準(zhǔn)備1個(gè)無(wú)菌的15毫升錐形離心管
- 搖勻試劑盒里的高純液(Reagent A)
- 移出xx毫升高純液(Reagent A)到15毫升錐形離心管
- 加入xx毫升稀釋液(Reagent B),混勻——此為高純工作液
- 小心沿著管壁,在高純工作液上面,一滴一滴加入5毫升新鮮抗凝全血樣品
- 室溫下,放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘,速度為350g(注意:避免使用快速制動(dòng))
- 小心取出離心管:可見(jiàn)上端二分之一處黃色血漿和下端四分之一處紅色血細(xì)胞之間的混濁血小板樣品帶
- 小心抽去血小板樣品帶以上的血漿液體
- 小心收集血小板樣品帶到2毫升離心管(注意:置于血漿和血小板樣品帶交界處下緣小心緩慢抽吸)——
- 放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心20分鐘,速度為2000g
- 小心抽去上清液
- (選擇步驟)加入xx至xx毫升稀釋液(Reagent B)
- (選擇步驟)放進(jìn)微型離心機(jī)離心20分鐘,速度為2000g
- (選擇步驟)小心抽去上清液
- 加入xx微升稀釋液(Reagent B),混勻
- 放進(jìn)-70℃冰箱里保存
注意事項(xiàng) - 本產(chǎn)品為10次(5毫升全血/次)操作
- 操作時(shí),避免污染母液,尤其是高純液(Reagent A)
- 操作時(shí),須戴手套
- 建議使用新鮮抗凝全血
- 全血樣品采集建議使用EDTA二鉀血液抗凝液(HL12059.1)或ACD血液抗凝液(HL12059.4),
- 建議使用足夠的樣品量
- 血小板提取量因人而異;如果不足,建議增加全血量
8. 本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度(可達(dá)到99%)和產(chǎn)量zui為理想 9. 使用高純液(Reagent A)前,須搖勻后加入 10. 高純工作液zui低使用量為5毫升。大于5毫升血液樣品,與高純工作液1:1比例 11. 離心減速時(shí),不得使用制動(dòng)方式 12. 為了避免紅細(xì)胞和白細(xì)胞污染,抽吸血小板樣品帶時(shí),留出2至3毫米紅細(xì)胞與血小板交界處的液體(上圖藍(lán)色部分) - 每毫升全血平均可獲得2 X 108血小板
- 本公司提供系列血小板試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) - 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的血小板結(jié)構(gòu)完整
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的血小板維持正常活性
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶
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