細胞中性脂質(zhì)油紅O染色試劑盒 產(chǎn)品說明書 主要用途 細胞中性脂質(zhì)油紅O染色試劑是一種旨在使用高度脂溶性偶氮染料油性紅O染色技術(shù)，特異性地使細胞內(nèi)中性甘油三脂、脂質(zhì)以及脂蛋白顯示紅色，以分析細胞樣品中脂質(zhì)狀況的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種人體和動物細胞樣本。用于成脂細胞定性、細胞病理學分析（脂質(zhì)細胞瘤；LIPOID）和識別（脂肪肉瘤；liposarcoma）等研究。產(chǎn)品即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，著色清晰。 技術(shù)背景 脂類物質(zhì)（LIPIDS）是一類脂溶性（疏水性）的自然分子，包括脂肪酸（FATTY ACID）及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂，以及其它固醇類（STEROL）物質(zhì)，例如膽固醇。脂類物質(zhì)在機體中具有能量儲存的作用，是膜結(jié)構(gòu)的組成成分和細胞信號分子。油性紅O（Oil Red O），又稱為27號紅色溶劑（Solvent Red 27）或蘇丹紅5B（Sudan Red 5B），是一種脂溶性偶氮染料（LYSOCHROME AZO DYE）。其分子式為C26H24N4O，分子量為408.51。染色顯示細胞脂類物質(zhì)呈紅色。 產(chǎn)品內(nèi)容 清理液（Reagent A） 毫升 固著液（Reagent B） 毫升 脫水液（Reagent C） 毫升 染色液（Reagent D） 毫升 澄清液（Reagent E） 毫升 產(chǎn)品說明書 1份 保存方式 保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent D），避免光照；有效保證6月 用戶自備 蘇木素復染試劑盒：用于常規(guī)染色后復染 經(jīng)典水相封片液：用于染色后封片處理 小型染色缸：用于細胞染色操作 溫箱：用于試劑預熱或保存 光學顯微鏡：用于組織細胞染色后觀察分析 實驗步驟 實驗開始前，將染色液（Reagent D）置于60℃溫箱里預熱，避免光照。然后進行下列操作。 操作一：細胞載玻片染色 - 取出待測的細胞載玻片
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A）在載玻片上，鋪滿整個樣品表面
- 小心移去載玻片上的清理液（Reagent A）
- 小心加上xx微升固著液（Reagent B），鋪滿整個樣品表面
- 室溫下，孵育10分鐘
- 小心移去載玻片上的固著液（Reagent B）
- 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗樣品表面
- 小心移去載玻片上的清理液（Reagent A）
- 重復實驗步驟7至8一次
二、樣本染色處理 - 小心加上xx微升脫水液（Reagent C）在載玻片上，鋪滿整個載玻片樣品表面
- 室溫下靜置5分鐘
- 小心移去載玻片上的脫水液（Reagent C）
- 重復實驗步驟1至3一次
- 小心加上xx微升染色液（Reagent D），鋪滿整個載玻片樣品表面
- 室溫下靜置7分鐘；或直至可見紅色
- 小心移去載玻片上的染色液（Reagent D）
- 室溫下，小心將載玻片置入xx毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
- 輕輕移去載玻片上的清理液（Reagent A）
三、 樣本復染處理 - 小心加上xx微升澄清液（Reagent E）在載玻片上，鋪滿整個載玻片樣品表面
- 室溫下孵育3分鐘
- 小心移去載玻片上的澄清液（Reagent E）
- 室溫下，小心將載玻片置入xx毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
- 小心移去載玻片上的清理液（Reagent A）
- （選擇步驟）樣本復染處理（蘇木素）
- 放上蓋玻片或水相封片
- 即刻在一般光學顯微鏡下觀察
操作二：24孔細胞培養(yǎng)板染色 一、樣本固著處理 1．小心抽去24孔細胞培養(yǎng)板里的培養(yǎng)液 2．每孔加入xx微升清理液（Reagent A），清洗生長中的細胞表面 3．小心抽去每孔里的清理液（Reagent A） 4．每孔加入xx微升固著液（Reagent B），覆蓋整個生長表面 5．在室溫下孵育10分鐘 6．小心抽去固著液（Reagent B） 7．每孔加入xx微升清理液（Reagent A），清洗細胞表面 8．小心抽去清理液（Reagent A） 9．重復實驗步驟7和8二次 二、樣本染色處理 - 小心加上xx微升脫水液（Reagent C），覆蓋整個生長表面
- 室溫下靜置5分鐘
- 小心抽去脫水液（Reagent C）
- 重復實驗步驟1至3一次
- 小心加上xx微升染色液（Reagent D），覆蓋整個生長表面
- 室溫下靜置7分鐘；或直至可見紅色
- 小心抽去染色液（Reagent D）
- 室溫下，小心加入xx微升清理液（Reagent A）
- 室溫下孵育2分鐘
- 小心抽去清理液（Reagent A）
三、 樣本復染處理 - 小心加上xx微升平衡液（Reagent E），覆蓋整個生長表面
- 室溫下孵育5分鐘
- 小心抽去平衡液（Reagent E）
- 小心加入xx微升清理液（Reagent A）
- 室溫下孵育2分鐘
- 小心抽去清理液（Reagent A）
- 樣本復染處理（蘇木素）
- 即刻在一般光學顯微鏡下觀察
注意事項 - 本產(chǎn)品為20次（細胞載玻片）操作
- 操作時，須戴手套
- 所有操作在室溫下進行
- 每次更換試劑溶液時，保持細胞表面基本晾干。空氣中晾干狀態(tài)為沒有水滴，呈濕潤狀態(tài)，可見反光
- 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿細胞表面
- 樣品染色避免過度，肉眼可見紅色即可終止染色
- 建議使用蘇木素復染試劑盒，增加染色對比度
- 細胞染色完成后，即刻進行光學顯微鏡觀察
- 封片處理，避免使用有機溶劑類包括乙醇等，而使用水相封片液；
- 本公司提供系列脂類染色試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標準 - 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰
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