主要用途 植物組織葉綠體DNA萃取試劑是一種旨在通過(guò)物理破壁和化學(xué)破膜及離心處理方法，從植物組織中分離出完整而純化的葉綠體細(xì)胞器，然后進(jìn)一步生物酶處理以獲得高質(zhì)量的葉綠體DNA的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于菠菜、豌豆、萵苣、卷心菜、甜菜、煙草等各種新鮮植物組織，包括葉片（leaf）、谷粒（grain）、種子（seed）等葉綠體核酸成分的分離。用于高等植物不育性、葉綠體遺傳等研究。適合于后續(xù)的雜交、克隆、酶切、PCR分析等。產(chǎn)品即到即用，操作簡(jiǎn)易，性能穩(wěn)定，無(wú)核酶污染，萃取純度和產(chǎn)量皆高。 技術(shù)背景 葉綠體（chloroplast）是綠色植物進(jìn)行光合作用和能量轉(zhuǎn)化的重要細(xì)胞器。葉綠體是細(xì)胞質(zhì)中的一種色素體，因含葉綠素而成綠色。葉綠體由外被（envelope）、類囊體（thylakoid）和基質(zhì)（stroma）組成。葉綠體DNA是一種閉合環(huán)狀雙股結(jié)構(gòu)，含有10至30個(gè)基因，編碼200個(gè)蛋白質(zhì)。 用戶自備 15毫升錐形離心管：用于葉綠體初步制備物存放的容器
50毫升錐形離心管：用于植物組織收集、離心和清洗的容器
1.5毫升離心管：用于保存葉綠體
尼龍絲或60微米尼龍網(wǎng)：用于去除植物裂解殘?jiān)?br />小型漏斗：用于過(guò)濾的裝置
4℃臺(tái)式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞和分離細(xì)胞器成分
微型臺(tái)式離心機(jī)：用于沉淀核酸
DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞
58℃恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)物
渦旋震蕩儀：用于混勻 注意事項(xiàng) 1．本產(chǎn)品為10次操作（1克植物組織）
2．建議使用新鮮植物樣品，暗室4℃冰箱里過(guò)夜
3．植物樣品務(wù)必避光，以防止淀粉聚集
4．葉綠體操作均須在4℃或以下?tīng)顟B(tài)下進(jìn)行
5．操作時(shí)，須無(wú)菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（Reagent B）和保存液（Reagent E）
6．建議使用足夠的組織量
7．建議植物組織使用物理法組織勻漿器操作為；德國(guó)的BRAUN細(xì)胞勻漿器zui為理想
8．建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間
9．通常勻化次數(shù)為80下（或組織塊狀消失為止）達(dá)到80％的組織細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織類型會(huì)存在差異。用戶可以通過(guò)顯微鏡觀察3微升勻漿物的組織細(xì)胞裂解程度：完整組織細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)
10．通常孵育5分鐘達(dá)到80％的組織細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織類型會(huì)存在差異。用戶可以通過(guò)顯微鏡觀察3微升勻漿物的組織細(xì)胞裂解程度：完整組織細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)
11．試劑中的溶液使用前搖勻；酶解液（Reagent G）需放進(jìn)37℃溫育少許；為避免反復(fù)凍融，建議適量分裝
12．通常1克植物組織中提取的葉綠體DNA達(dá)1至10微克
13．如果需要獲得99％以上純度的葉綠體DNA，建議使用高多糖/酚植物組織葉綠體DNA高純分離試劑盒－16011.3.2
14．本公司提供系列植物葉綠體分析技術(shù)產(chǎn)品 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)核酶污染
3．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定萃取產(chǎn)量和純化程度高
4．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)基因組DNA污染 |
