主要用途 活體細(xì)胞線粒體膜通道孔（MPTP）紅色熒光（TMRM）檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)四甲基羅丹明甲酯染料，選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色，一旦釋放到細(xì)胞漿，其熒光性顯著降低，來(lái)分析和觀察線粒體膜通道孔活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞線粒體（動(dòng)物、人體、昆蟲(chóng)等）膜通道孔活性（開(kāi)放狀態(tài)）的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，活體檢測(cè)，分辨率高，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。 技術(shù)背景 線粒體膜通道孔（mitochondrial permeability transition pore；MPTP）是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴(lài)性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí)，線粒體內(nèi)容物通過(guò)膜通道孔釋放到胞漿中。線粒體膜電位的去極化（depolarization），導(dǎo)致膜通道孔的開(kāi)放，顯著改變線粒體的通透性，使之線粒體膨脹（swelling），內(nèi)容物釋放。其中鈣離子過(guò)度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開(kāi)放，而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。四甲基羅丹明甲酯（tetramethylrhodamine methyl ester；TMRM），為羅丹明衍生物陽(yáng)離子染料，作為電勢(shì)測(cè)定（potentiometric）熒光探針：*，具有親脂性的； 第二，與線粒體內(nèi)膜負(fù)電極結(jié)合而聚集；第三，容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。四甲基羅丹明甲酯進(jìn)入細(xì)胞后，被細(xì)胞內(nèi)酯酶切離，產(chǎn)生四甲基羅丹明。四甲基羅丹明進(jìn)入線粒體后，被線粒體俘獲，呈現(xiàn)強(qiáng)烈熒光。一旦線粒體膜通道孔開(kāi)放，四甲基羅丹明釋放出來(lái)而在胞漿重新分布，其熒光性顯著降低。線粒體內(nèi)熒光的變化，表明膜通道孔的開(kāi)放狀態(tài)。
注意事項(xiàng) 1．本產(chǎn)品為20次（0.5毫升體系/次）操作
2．操作時(shí)，須戴手套
3．操作時(shí)，避免污染母液
4．染色前，所有試劑溶液，除染色液（Reagent B）外，需37℃預(yù)熱
5．建議細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行熒光檢測(cè)分析
6．孵育時(shí)，必須避免光照
7．本產(chǎn)品友好使用于雙重染色或重疊染色
8．本產(chǎn)品適合各種規(guī)格的培養(yǎng)細(xì)胞：載玻片，載玻片培養(yǎng)皿，35mm培養(yǎng)皿，和各種培養(yǎng)孔板，須相應(yīng)調(diào)整處理液
9．可以使用±10nm波長(zhǎng)的濾波器
10．可以使用100微摩爾CaCl2處理的樣品作為膜通道孔開(kāi)放的陽(yáng)性對(duì)照
11．如果膜通道孔為瞬時(shí)開(kāi)放（transient），則熒光緩慢且自發(fā)降低
12．本公司提供膜通道孔抑制劑：0.2毫摩爾環(huán)胞素A（cyclosporine A）－12226，維護(hù)熒光完整
13．本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰 |
