石蠟切片組織馮庫薩染色試劑盒 產(chǎn)品說明書
主要用途
石蠟切片組織馮庫薩（VON KOSSA）染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)分離石蠟方法
和銀還原技術(shù)，分析存檔中的石蠟包埋的組織切片中鈣沉積現(xiàn)象的而經(jīng)典的技術(shù)方法。
該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心改良VON KOSSA 方法、成功實驗證明的。主要適用于石蠟包
埋組織切片的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測。廣泛用于骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無
菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，顯色清晰。
技術(shù)背景
鈣鹽變化是骨細(xì)胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標(biāo)志之一。通過嗜銀染色，鈣離子受到強光
還原，由金屬銀沉積取代，呈現(xiàn)黑色。
產(chǎn)品內(nèi)容
去石蠟液（Reagent A） 毫升
補水液A（Reagent B） 毫升
補水液B（Reagent C） 毫升
補水液C（Reagent D） 毫升
補水液D（Reagent E） 毫升
清理液（Reagent F） 毫升
染色液（Reagent G） 毫升
平衡液（Reagent H） 毫升
產(chǎn)品說明書1 份
保存方式
保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent G），避免光照；有效保證6 月
用戶自備
核固紅復(fù)染試劑盒：用于常規(guī)染色后復(fù)染
小型染色缸：用于石蠟切片的去石蠟和染色操作
60 瓦燈：用于還原鈣離子
光學(xué)顯微鏡：用于組織細(xì)胞染色后觀察分析
實驗步驟
一、去石蠟處理
1． 取出10 片待測的石蠟包埋的組織切片（注意：石蠟包埋前，組織切片須用10％甲醛4
℃條件下，固定16 小時，此步很重要）
2． 放進80℃烘箱，孵育30 分鐘
3． 室溫下靜置15 分鐘
4． 按下表依次放進小染色缸里孵育
染色缸孵育時間
毫升去石蠟液（Reagent A） 15 分鐘
毫升去石蠟液（Reagent A） 15 分鐘
毫升去石蠟液（Reagent A） 15 分鐘
毫升補水液A（Reagent B） 3 分鐘
毫升補水液B（Reagent C） 3 分鐘
毫升補水液C（Reagent D） 3 分鐘
毫升補水液D（Reagent E） 3 分鐘
5． 小心移去切片上的補水液D（Reagent E）
6． 小心加上xx 微升清理液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
7． 室溫下孵育5 分鐘
8． 小心移去切片上的清理液（Reagent F）
二、樣本染色處理
1. 小心加上xx 微升染色液（Reagent G），鋪滿整個切片樣品表面
2. 室溫下置于太陽光直射或60 瓦燈直射孵育60 分鐘；或直至可見黑色
3. 小心移去切片上的染色液（Reagent G）
4. 室溫下，小心將切片置入xx 毫升清理液（Reagent F）中孵育2 分鐘
5. 輕輕移去切片上的清理液（Reagent F）
三、樣本復(fù)染處理
1. 小心加上xx 微升平衡液（Reagent H）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
2. 室溫下孵育5 分鐘
3. 小心移去切片上的平衡液（Reagent H）
4. 室溫下，小心將切片置入xx 毫升清理液（Reagent F）中孵育2 分鐘
5. 小心移去切片上的清理液（Reagent F）
6. （選擇步驟）樣本復(fù)染處理（核固紅）
7. 放上蓋玻片或封片
8. 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察：鈣沉積陽性細(xì)胞呈現(xiàn)黑色（如果復(fù)染：細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)粉紅
色，細(xì)胞核呈現(xiàn)紅色）
注意事項
1． 本產(chǎn)品為50 次操作
2． 操作時，須戴手套
3． 石蠟包埋前，組織切片須用10％甲醛4℃條件下，固定16 小時，否則造成樣品支離破
碎
4． 所有操作在室溫下進行
5． 每次更換試劑溶液時，保持切片面基本晾干。空氣中晾干狀態(tài)為沒有水滴，呈濕潤狀態(tài)，
可見反光
6． 試劑溶液在切片表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿切片表面
7． 樣品染色避免過度，肉眼可見黑色即可終止染色
8． 建議使用核固紅復(fù)染試劑盒
9． 組織細(xì)胞染色完成后，即刻進行光學(xué)顯微鏡觀察
10．本公司提供系列組織細(xì)胞金屬元素染色試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰 |
