500毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液 產(chǎn)品說明書 主要用途 500毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液是一種旨在模擬超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基陰離子的輔助試劑。其適用于氧化應(yīng)急活性氧等研究。其適用于各種細胞培養(yǎng)、動物實驗中超氧自由基陰離子的清除。產(chǎn)品即到即用，嚴格無菌，性能穩(wěn)定，高純活性。 技術(shù)背景 4-羥基-2,2,6,6,-四甲基哌啶氧（4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidinyloxy；TEMPO）是一種自旋標記（spin label）的水溶性穩(wěn)定哌啶氮氧化合物（piperidine nitroxide），分子式是C9H18NO2，分子量為172.24。其主要作用在于自由通過質(zhì)膜，具有超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基陰離子，起到活性氧的解毒作用，同時具有神經(jīng)保護、抗炎和鎮(zhèn)痛作用。 產(chǎn)品內(nèi)容 清除劑（Reagent A） 毫升 產(chǎn)品說明書 1份 保存方式 保存在－20℃冰箱里，避免光照；有效保證6月 用戶自備 *細胞培養(yǎng)液：用于支持細胞生長的營養(yǎng)液 細胞培養(yǎng)板（瓶）：用于細胞培養(yǎng)的容器 蓋玻片：用于細胞生長的載體 臺式離心機：用于懸浮細胞的收集 細胞培養(yǎng)箱：用于細胞孵育 15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器 實驗提示 實驗開始前，將－20℃冰箱里的清除劑（Reagent A）置于冰槽里融化。然后進行下列操作： 方法一：貼壁細胞處理 - 在6孔細胞培養(yǎng)板里的1孔放置蓋玻片
- 加入2毫升用戶自備的*細胞培養(yǎng)液
- 加入1毫升待測細胞（1至5 X 105細胞）
- 輕輕搖動，使細胞均勻分布
- 放進37℃細胞培養(yǎng)箱孵育，直至細胞生長到50％鋪滿率
- 小心抽掉細胞培養(yǎng)液
- 加入3毫升新鮮的用戶自備的*細胞培養(yǎng)液
- 加入xx微升清除劑（Reagent A）
- 輕輕搖動培養(yǎng)板，混勻
- 放進37℃細胞培養(yǎng)箱孵育24小時
- 小心抽掉含有清除劑（Reagent A）的細胞培養(yǎng)液
- 繼續(xù)后續(xù)操作
方法二：懸浮細胞處理 - 準備1個25cm2細胞培養(yǎng)瓶
- 加入2毫升用戶自備的*細胞培養(yǎng)液
- 加入1毫升待測細胞（5 X 105細胞）
- 輕輕搖動，使細胞均勻分布
- 放進37℃細胞培養(yǎng)箱孵育24小時
- 小心移出細胞培養(yǎng)液到15毫升錐形離心管
- 放進臺式離心機離心10分鐘，速度為300g
- 小心抽掉上清液
- 加入3毫升新鮮的*細胞培養(yǎng)液，混勻細胞顆粒群
- 加入xx微升清除劑（Reagent A）
- 輕輕搖動離心管，混勻
- 放進37℃細胞培養(yǎng)箱孵育24小時
- 放進臺式離心機離心10分鐘，速度為300g
- 小心抽掉含有清除劑（Reagent A）的細胞培養(yǎng)液
- 繼續(xù)后續(xù)操作
方法三：動物實驗 - 準備1個待測的實驗動物
- 靜脈注射xx微升清除劑（Reagent A）/100克動物體重
- 或腹腔注射xx微升清除劑（Reagent A）/100克動物體重
- 或輸液/灌注xx至xx微升清除劑（Reagent A）/100克動物體重
- 注射后30分鐘至4小時繼續(xù)后續(xù)麻醉、斷頸椎、解剖、組織制片等操作
注意事項 - 本產(chǎn)品為1毫升規(guī)格（100倍濃度）
- 本產(chǎn)品即到即用，無需進行任何處理
- 使用時，戴好手套
- 避免反復(fù)凍融
- 使用時，避免污染母液
- 細胞孵育時間可以根據(jù)用戶的具體情況調(diào)整，通常為6小時至24小時
- 動物實驗可以每天注射，持續(xù)1周，然后觀察分析
- 本公司提供系列活性氧清除試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標準 - 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
- 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定嚴格無菌
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